Аннотация:
<strong>Введение</strong>. Со времени создания инактивированных полиомиелитных вакцин различные стадии производственного процесса изменялись и совершенствовались. Современное производство вакцин на основе как диких, так и аттенуированных штаммов включает несколько технологических стадий, одной из которых является концентрирование вируссодержащей жидкости, позволяющее сконцентрировать вирус полиомиелита и очистить вируссодержащую жидкость от значительной части балластных компонентов.
<strong>Целью</strong> исследования были сравнительная характеристика ультрафильтрационных мембран и подбор мембраны, обеспечивающей оптимальные показатели очистки и концентрирования вируса полиомиелита типа 1 (штамм Сэбина).
<strong>Материалы и методы</strong>. Для проведения работ по концентрированию использовали лабораторные ультрафильтрационные системы двух производителей с мембранами 50, 100 и 300 кДа. Полученные результаты оценивали по содержанию общего белка, составляющего основную нагрузку на последующие стадии очистки, количеству инфекционного титра вируса в концентрате и содержанию D-антигена как целевого продукта. Оценивали также фактическое отсечение компонентов вируссодержащей жидкости различными мембранами для определения состава белковой нагрузки на целевой продукт.
<strong>Результаты и обсуждение</strong>. Содержание D-антигена и очистка от примесных белков (содержание общего белка в концентрате) были наиболее оптимальными при концентрировании с использованием мембраны с отсечением 300 кДа. Вне зависимости от показателя отсечения мембраны, подавляющая часть клеточных компонентов вируссодержащей жидкости не отсекается на стадии осветляющей и стерилизующей фильтрации, а концентрируется и составляет основную белковую нагрузку на целевой продукт.
<strong>Заключение</strong>. С точки зрения качества получаемого целевого продукта и технологичности производственного процесса использование мембраны 300 кДа является наиболее целесообразным при отработке технологии изготовления инактивированных полиомиелитных вакцин с использованием штаммов Сэбина вируса полиомиелита и культуры клеток линии Vero в качестве культуры-продуцента.
<p><strong>Introduction</strong>. Since the development of inactivated polio vaccines, different stages of the production process have been changed and improved. Current production of inactivated polio vaccines based on both wild and attenuated strains includes several technological stages, one of which is the concentration of the virus-containing liquid, which ensures poliovirus concentration, and purification of the virus-containing liquid from a significant part of the ballast components.</p><p><strong>Research objective</strong> is to compare the characteristics of ultrafiltration membranes and select the membranes that provide optimal value of purification and concentration of poliovirus type 1 (Sabin strain).</p><p><strong>Materials and methods</strong>. Laboratory ultrafiltration systems from two manufacturers with 50, 100, and 300 kDa membranes were used for the concentration. Results were evaluated by the content of total protein, which is the main stress for the subsequent purification stages, the value of infectious virus titer in the concentrate, and the content of D-antigen as the target product.</p><p><strong>Results and discussion</strong>. Obtained results demonstrated that the content of the target product (the highest D-antigen content) and purification from impurity proteins (the total protein content in the concentrate) were most optimal when a membrane with a cut-off of 300 kDa was used for concentration. The study also evaluated the real cut-off components by various membranes to determine the composition of the protein load on the target product.</p><p><strong>Conclusion</strong>. In terms of quality of the resulting target product and the manufacturability of the production process, the use of a 300 kDa membrane is the most appropriate when working out the technology for manufacturing inactivated polio vaccine based on Sabin strains of poliovirus and the Vero line as a producing culture.</p> Ковпак А.А. «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Ивин Ю.Ю. Юрий Юрьевич «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Пиняева А.Н. Анастасия Николаевна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Хапчаев Ю.Х. «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Ожерелков С.В. «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Белякова А.В. «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Ишмухаметов А.А. «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»; Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
«Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)
Kovpak A.A. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Ivin Y.Y. Yury Yu. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Piniaeva A.N. Anastasia N. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Khapchaev Y.K. Yu. Kh. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Ozherelkov S.V. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Belyakova A.V. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Ishmukhametov A.A. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences; I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)
Application of ultrafiltration membranes for purification and concentration of Sabin poliovirus type 1 eng
Применение ультрафильтрационных мембран для очистки и концентрирования вируса полиомиелита типа 1 штамм Сэбина
Текст визуальный электронный
Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Central Research Institute for Epidemiology
Т. 98, № 2 С. 135-143
2021
ультрафильтрация
ultrafiltration
концентрирование
concentration
полиомиелит
inactivated polio vaccine
инактивированная полиомиелитная вакцина
oral polio vaccine
пероральная полиомиелитная вакцина
poliomyelitis
Статья
<strong>Введение</strong>. Со времени создания инактивированных полиомиелитных вакцин различные стадии производственного процесса изменялись и совершенствовались. Современное производство вакцин на основе как диких, так и аттенуированных штаммов включает несколько технологических стадий, одной из которых является концентрирование вируссодержащей жидкости, позволяющее сконцентрировать вирус полиомиелита и очистить вируссодержащую жидкость от значительной части балластных компонентов.
<strong>Целью</strong> исследования были сравнительная характеристика ультрафильтрационных мембран и подбор мембраны, обеспечивающей оптимальные показатели очистки и концентрирования вируса полиомиелита типа 1 (штамм Сэбина).
<strong>Материалы и методы</strong>. Для проведения работ по концентрированию использовали лабораторные ультрафильтрационные системы двух производителей с мембранами 50, 100 и 300 кДа. Полученные результаты оценивали по содержанию общего белка, составляющего основную нагрузку на последующие стадии очистки, количеству инфекционного титра вируса в концентрате и содержанию D-антигена как целевого продукта. Оценивали также фактическое отсечение компонентов вируссодержащей жидкости различными мембранами для определения состава белковой нагрузки на целевой продукт.
<strong>Результаты и обсуждение</strong>. Содержание D-антигена и очистка от примесных белков (содержание общего белка в концентрате) были наиболее оптимальными при концентрировании с использованием мембраны с отсечением 300 кДа. Вне зависимости от показателя отсечения мембраны, подавляющая часть клеточных компонентов вируссодержащей жидкости не отсекается на стадии осветляющей и стерилизующей фильтрации, а концентрируется и составляет основную белковую нагрузку на целевой продукт.
<strong>Заключение</strong>. С точки зрения качества получаемого целевого продукта и технологичности производственного процесса использование мембраны 300 кДа является наиболее целесообразным при отработке технологии изготовления инактивированных полиомиелитных вакцин с использованием штаммов Сэбина вируса полиомиелита и культуры клеток линии Vero в качестве культуры-продуцента.
<p><strong>Introduction</strong>. Since the development of inactivated polio vaccines, different stages of the production process have been changed and improved. Current production of inactivated polio vaccines based on both wild and attenuated strains includes several technological stages, one of which is the concentration of the virus-containing liquid, which ensures poliovirus concentration, and purification of the virus-containing liquid from a significant part of the ballast components.</p><p><strong>Research objective</strong> is to compare the characteristics of ultrafiltration membranes and select the membranes that provide optimal value of purification and concentration of poliovirus type 1 (Sabin strain).</p><p><strong>Materials and methods</strong>. Laboratory ultrafiltration systems from two manufacturers with 50, 100, and 300 kDa membranes were used for the concentration. Results were evaluated by the content of total protein, which is the main stress for the subsequent purification stages, the value of infectious virus titer in the concentrate, and the content of D-antigen as the target product.</p><p><strong>Results and discussion</strong>. Obtained results demonstrated that the content of the target product (the highest D-antigen content) and purification from impurity proteins (the total protein content in the concentrate) were most optimal when a membrane with a cut-off of 300 kDa was used for concentration. The study also evaluated the real cut-off components by various membranes to determine the composition of the protein load on the target product.</p><p><strong>Conclusion</strong>. In terms of quality of the resulting target product and the manufacturability of the production process, the use of a 300 kDa membrane is the most appropriate when working out the technology for manufacturing inactivated polio vaccine based on Sabin strains of poliovirus and the Vero line as a producing culture.</p>