VEGF-C — биомаркер повреждения почек при экспериментальной интраабдоминальной гипертензии

Лимфангиогенез играет важную роль в развитии воспаления паренхимы почек при их повреждении. Васкулоэндотелиальный фактор роста тип С (vascular endothelial growth factor, VEGF-C) — цитокин, регулирующий лимфангиогенез, — является потенциальным ранним биомаркером острого повреждения почек.Цель. Изучить содержание VEGF-C в почечном гомогенате и сыворотке крови новорожденных крыс с экспериментальной интраабдоминальной гипертензией (ИАГ) различной тяжести и длительности, установить взаимосвязь с морфологическими изменениями в паренхиме почек.Материалы и методы. Эксперимент проведен на 50 новорожденных крысах линии Wistar, которые были разделены на 5 групп по 10 особей: группы 1 и 2 с легкой ИАГ длительностью 5 и 10 дней соответственно, группы 3 и 4 с тяжелой ИАГ длительностью 5 и 10 дней соответственно и 5-я контрольная группа. ИАГ достигалась введением стерильного вазелина в брюшную полость до заданного уровня интраабдоминального давления под контролем интравезикальной манометрии. Содержание VEGF-C измерялось методом ELISA. Морфологическое исследование биопсийного материала и его фотосъемка осуществлялись на микроскопе Leica DM2000. Сравнение групп проводилось с помощью критериев Манна — Уитни, Краскела — Уоллиса, Вилкоксона; проводился однофакторный дисперсионный анализ.Результаты. Отмечено увеличение концентрации VEGF-C в почечном гомогенате во всех экспериментальных группах (pк < 0,001). Степень повышения VEGF-C зависела от тяжести ИАГ (p < 0,05), но не от длительности экспозиции ИАГ. Содержание VEGF-C в сыворотке крови было повышено только в 3-й группе (pк = 0,011). При морфологическом исследовании установлены изменения, которые характерны для гидропической дистрофии: изменение высоты канальцевого эпителия, нарастание отека интерстиция, расширение мочевых пространств гломерул. Степень морфологических изменений паренхимы почек зависела от тяжести и длительности ИАГ.Заключение. Наблюдалась взаимосвязь между морфологическими изменениями паренхимы почек при ИАГ различной тяжести и длительности и изменением уровня VEGF-C в почечном гомогенате.

Lymphangiogenesis plays an important role in development of renal parenchyma inflammation during kidney injury. Vascular endothelial growth factor type C (VEGF-C), cytokine that regulates lymphangiogenesis, is a potential early biomarker for acute kidney injury. Aim. To study the concentration of VEGF-C in renal homogenate and blood serum of newborn rats with experimental intraabdominal hypertension (IAH) of varying severity and duration, to establish a relationship with morphological changes in the renal tissue. Materials and methods. The experiment was conducted on 50 newborn Wistar rats. Rats were divided into 5 groups of 10 rats each: groups 1 and 2 with mild IAH lasting 5 and 10 days, respectively, and groups 3 and 4 with severe IAH lasting 5 and 10 days, respectively, and the control group. IAH was modelled by injecting sterile vaseline into the abdominal cavity to a predetermined level of IAH under the control of intra-vesical manometry. VEGF-C content was measured by ELISA. Morphological examination of the biopsy material and its photography were carried out using a Leica DM2000 microscope. The Mann—Whitney, Kruskal—Wallis, Wilcoxon tests, as well as one-way ANOVA, were used for statistical analysis. Results. The level of VEGF-C in the renal homogenate was increased in all groups (pc < 0.001); the degree of VEGF-C increase depended on the severity of IAH (p < 0.05) but not on the duration of IAH exposure. The VEGF-C blood serum level was increased only in group 3 (pc = 0.011). Morphological analysis showed hydropic dystrophy: changes in the height of the tubular epithelium, an increase in interstitial edema, expansion of the urinary spaces of glomeruli. The degree of morphological changes depended on the severity and duration of IAH. Conclusion. Changes in VEGF-C level assessed in the renal homogenate correlated with morphological changes in renal tissue of rats with different severity and duration of IAH.

摘要淋巴管新生在肾损伤时肾实质炎症过程的发展中扮演着重要的角色。血管内皮生长因子C（VEGF-C）是调节淋巴管新生的细胞因子，因而是具有潜力的急性肾损伤的早期生物标记物。目的利用新生鼠模拟实验，研究在严重程度和持续时间不同的腹内高压（IAH）背景下VEGF-C在肾脏匀浆和血清中的浓度，并确定其与肾实质形态学变化的相互关系。材料和方法实验在50只新生实验白鼠进行。实验鼠分为5组，每组10只：第1组和第2组伴有轻度的腹内高压，持续时间分别为5天和10天。第3组和第4组有严重的腹内高压，持续时间分别为5天和10天。第5组为对照组。通过在膀胱测压法的控制下将无菌凡士林注射入腹腔至预定水平的腹内高压来对其进行模拟。VEGF-C含量通过酵素结合免疫吸附分析法(ELISA，Enzyme-linked immunosorbent assay） 测量。使用徕卡DM2000显微镜对活检材料进行形态学研究并照相。使用曼-惠特尼U检验Mann-Whitney，克鲁斯卡尔-沃利斯检验（Kruskal-Wallis），威尔科克森符号秩检验Wilcoxon以及单向方差分析ANOVA来进行统计分析。结果所有组的肾脏匀浆中的VEGF-C水平均升高（pc < 0.001）； VEGF-C增加的程度取决于腹内高压的严重程度（p < 0,05），而不取决于腹内高压的持续时间。VEGF-C血清水平仅在第3组增加（pc = 0.011）。形态学上观察到水肿性变性：肾小管上皮的高度改变，间质性水肿增加重，肾小球的尿路扩张。肾实质形态变化的程度取决于腹内高压的严重程度和持续时间。结论在严重程度及持续时间各异的腹内高压背景下，实验白鼠的肾实质形态学变化与肾脏匀浆中的VEGF-C水平变化存在关联性。