Аннотация:
<strong>Актуальность.</strong> Активация нейтрофилов – обязательный этап и чувствительный маркер системного воспалительного ответа. С развитием этого состояния сопряжено возникновение полиорганной недостаточности – основного показания для пребывания пациентов в отделении реанимации. Поиск препаратов, способных предотвратить развитие системного воспалительного ответа и снизить летальность, остается актуальной задачей анестезиологииреаниматологии.
<strong>Цель </strong> – изучить противовоспалительное действие синтетического аналога лей-энкефалина (препарат даларгин) на нейтрофилах человека in vitro.
<strong>Материал и методы</strong>. Исследование проводилось на выделенных из крови 5 здоровых доноров нейтрофилах, часть из которых активировали с помощью 10 мкM формил-Мет-Лей-Про (fMLP) и 100 нг/мл липополисахарида (ЛПС) и затем оценивали их активность с помощью флуоресцентных антител к маркерам дегрануляции CD11b и CD66b. Интактные и активированные нейтрофилы обрабатывали раствором даларгина в концентрациях 50 и 100 мкг/мл.
<strong>Результаты</strong>. Даларгин в концентрации 100 мкг/мл в 5,5 раза (р=0,008) снижает уровень экспрессии молекул CD11b на поверхности интактных нейтрофилов, а ЛПС в дозе 100 нг/мл, напротив, увеличивает экспрессию тех же молекул на 46[%] (р=0,08). Добавление даларгина в концентрации 50 мкг/мл к нейтрофилам, активированным ЛПС, уменьшает экспрессию молекул CD11b (р=0,016). Добавление даларгина в концентрациях 50 мкг/мл к активированным fMLP нейтрофилам значимо (р=0,008) уменьшает экспрессию молекул CD11b и возвращает ее практически к уровню контроля. Даларгина, добавленный в концентрации 100 мкг/мл к нейтрофилам, активированным fMLP в дозе 10 мкМ, уменьшает экспрессию CD11b на их поверхности до уровня ниже контроля на 23[%] (р=0,08).
<strong>Заключение</strong>. Даларгин в исследованных концентрациях оказывает противовоспалительное действие как на интактные, так и на предактивированные бактериальными компонентами нейтрофилы, ингибируя процесс активации и дегрануляции дозозависимым образом.
<p><strong>Background</strong>: Neutrophil activation is a mandatory stage and a sensitive marker of systemic inflammatory response. The development of this condition is associated with subsequent multiple organ failure which is the main indication for the patients stay in the intensive care unit. The search for drugs that could prevent the development of systemic inflammatory response and reduce mortality remains an urgent task of anesthesiology/resuscitation.</p><p><strong>Aim</strong>: To study the anti-inflammatory effect of dalargin, a synthetic analogue of lei-enkephalin, on human neutrophils in vitro.</p><p><strong>Materials and methods</strong>: The study was performed on blood neutrophils isolated from 5 healthy donors. A proportion of neutrophils were activated by 10 mkM formil-Met-Leu-Pro (fMLP) and 100 ng/mL lipopolysaccharide (LPS) with subsequent assessment of their activity by fluorescent antibodies to the degranulation markers CD11b and CD66b. Thereafter intact and activated neutrophils were treated with dalargin solution at concentrations of 50 and 100 mcg/mL.</p><p><strong>Results</strong>: Dalargin at 100 mcg/mL reduced the expression of CD11b molecules on the surface of intact neutrophils by 5.5-fold (p=0.008). On the contrary, LPS at a dose of 100 ng/mL increased the expression of the same molecules by 46[%] (p=0.08). The addition of dalargin at 50 mcg/mL to LPS-activated neutrophils reduced the expression of CD11b molecules (p=0.016). The addition of dalargin at 50 mcg/mL to fMLP-activated neutrophils significantly (p=0.008) reduced the expression of CD11b molecules and reversed their expression virtually to the level of the control. The addition of dalargin at 100 mcg/mL to neutrophils activated by fMLP at 10 mkM reduced the expression of CD11b on their surface to a level below the control by 23[%] (p=0.08).</p><p><strong>Conclusion</strong>: Dalargin at the studied concentrations has an anti-inflammatory effect on both intact and pre-activated bacterial components of neutrophils, thus inhibiting the process of activation and degranulation in a dose-dependent manner. </p> Гребенчиков О.А. МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М. Ф. Владимирского»; «Федеральный научно-КЦ реаниматологии и реабилитологии» – НИИ общей реаниматологии им. В.А. Неговского
Шабанов А.К. «Федеральный научно-КЦ реаниматологии и реабилитологии» – НИИ общей реаниматологии им. В.А. Неговского; НИИ скорой помощи им. Н. В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы
Косов А.А. МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М. Ф. Владимирского»
Скрипкин Ю.В. Первый МГМУ им. И.М. Сеченова МЗ РФ
Яворовский А.Г.
Лихванцев В.В. Первый МГМУ им. И.М. Сеченова МЗ РФ
МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М. Ф. Владимирского»
State government-financed healthcare institution of the Moscow region «Vladimirsky Moscow regional research clinical institute»
«Федеральный научно-КЦ реаниматологии и реабилитологии» – НИИ общей реаниматологии им. В.А. Неговского
Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and Rehabilitology, V.A. Negovsky Scientific Research Institute of General Reanimatology
НИИ скорой помощи им. Н. В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Москвы
N. V. Sklifosovsky Research Institute of Emergency Medicine
Первый МГМУ им. И.М. Сеченова МЗ РФ
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет)
Grebenchikov O.A. State government-financed healthcare institution of the Moscow region «Vladimirsky Moscow regional research clinical institute»; Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and Rehabilitology, V.A. Negovsky Scientific Research Institute of General Reanimatology
Shabanov A.K. Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and Rehabilitology, V.A. Negovsky Scientific Research Institute of General Reanimatology; N. V. Sklifosovsky Research Institute of Emergency Medicine
Kosov A.A. State government-financed healthcare institution of the Moscow region «Vladimirsky Moscow regional research clinical institute»
Skripkin Y.V. Yu. V. I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
Yavorovsky A.G.
Likhvantsev V.V. I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
Synthetic leu-enkefalin analogue prevents activation of neutrophils induced by a bacterial component eng
Синтетический аналог лей-энкефалина предотвращает активацию нейтрофилов под действием бактериальных компонентов
Текст визуальный электронный
Альманах клинической медицины
Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)
Т. 47, № 3 С. 228-235
2019
воспаление
inflammation
лейкоциты
leukocyte
маркеры дегрануляции
degranulation test
даларгин
dalargin
Статья
<strong>Актуальность.</strong> Активация нейтрофилов – обязательный этап и чувствительный маркер системного воспалительного ответа. С развитием этого состояния сопряжено возникновение полиорганной недостаточности – основного показания для пребывания пациентов в отделении реанимации. Поиск препаратов, способных предотвратить развитие системного воспалительного ответа и снизить летальность, остается актуальной задачей анестезиологииреаниматологии.
<strong>Цель </strong> – изучить противовоспалительное действие синтетического аналога лей-энкефалина (препарат даларгин) на нейтрофилах человека in vitro.
<strong>Материал и методы</strong>. Исследование проводилось на выделенных из крови 5 здоровых доноров нейтрофилах, часть из которых активировали с помощью 10 мкM формил-Мет-Лей-Про (fMLP) и 100 нг/мл липополисахарида (ЛПС) и затем оценивали их активность с помощью флуоресцентных антител к маркерам дегрануляции CD11b и CD66b. Интактные и активированные нейтрофилы обрабатывали раствором даларгина в концентрациях 50 и 100 мкг/мл.
<strong>Результаты</strong>. Даларгин в концентрации 100 мкг/мл в 5,5 раза (р=0,008) снижает уровень экспрессии молекул CD11b на поверхности интактных нейтрофилов, а ЛПС в дозе 100 нг/мл, напротив, увеличивает экспрессию тех же молекул на 46[%] (р=0,08). Добавление даларгина в концентрации 50 мкг/мл к нейтрофилам, активированным ЛПС, уменьшает экспрессию молекул CD11b (р=0,016). Добавление даларгина в концентрациях 50 мкг/мл к активированным fMLP нейтрофилам значимо (р=0,008) уменьшает экспрессию молекул CD11b и возвращает ее практически к уровню контроля. Даларгина, добавленный в концентрации 100 мкг/мл к нейтрофилам, активированным fMLP в дозе 10 мкМ, уменьшает экспрессию CD11b на их поверхности до уровня ниже контроля на 23[%] (р=0,08).
<strong>Заключение</strong>. Даларгин в исследованных концентрациях оказывает противовоспалительное действие как на интактные, так и на предактивированные бактериальными компонентами нейтрофилы, ингибируя процесс активации и дегрануляции дозозависимым образом.
<p><strong>Background</strong>: Neutrophil activation is a mandatory stage and a sensitive marker of systemic inflammatory response. The development of this condition is associated with subsequent multiple organ failure which is the main indication for the patients stay in the intensive care unit. The search for drugs that could prevent the development of systemic inflammatory response and reduce mortality remains an urgent task of anesthesiology/resuscitation.</p><p><strong>Aim</strong>: To study the anti-inflammatory effect of dalargin, a synthetic analogue of lei-enkephalin, on human neutrophils in vitro.</p><p><strong>Materials and methods</strong>: The study was performed on blood neutrophils isolated from 5 healthy donors. A proportion of neutrophils were activated by 10 mkM formil-Met-Leu-Pro (fMLP) and 100 ng/mL lipopolysaccharide (LPS) with subsequent assessment of their activity by fluorescent antibodies to the degranulation markers CD11b and CD66b. Thereafter intact and activated neutrophils were treated with dalargin solution at concentrations of 50 and 100 mcg/mL.</p><p><strong>Results</strong>: Dalargin at 100 mcg/mL reduced the expression of CD11b molecules on the surface of intact neutrophils by 5.5-fold (p=0.008). On the contrary, LPS at a dose of 100 ng/mL increased the expression of the same molecules by 46[%] (p=0.08). The addition of dalargin at 50 mcg/mL to LPS-activated neutrophils reduced the expression of CD11b molecules (p=0.016). The addition of dalargin at 50 mcg/mL to fMLP-activated neutrophils significantly (p=0.008) reduced the expression of CD11b molecules and reversed their expression virtually to the level of the control. The addition of dalargin at 100 mcg/mL to neutrophils activated by fMLP at 10 mkM reduced the expression of CD11b on their surface to a level below the control by 23[%] (p=0.08).</p><p><strong>Conclusion</strong>: Dalargin at the studied concentrations has an anti-inflammatory effect on both intact and pre-activated bacterial components of neutrophils, thus inhibiting the process of activation and degranulation in a dose-dependent manner. </p>