Аннотация:
Стратегии взаимодействие герпесвирусов с клетками организма человека весьма сложны и многогранны. С одной стороны, существуют врожденные дефекты противовирусной иммунной защиты, в том числе и системы интерферонов, на фоне которых развиваются хронические упорно рецидивирующие вирусные инфекции, такие как повторные респираторные вирусные, герпесвирусные, папилломавирусные инфекции. С другой стороны, многие вирусы сами способны повреждать как иммунную систему, так и систему интерферонов. При врожденных и приобретенные дефектах системы интерферонов наблюдается врожденная или индуцированная мутация генов молекул, участвующих в сигналлинге, направленном на повышение экспрессии генов, ответственных за синтез IFN. Одной из стратегий вирусов является нарушение ряда клеточных сигнальных путей факторов транскрипции, в том числе ядерного фактора NF-kB. В настоящее время описана противовирусная активность НГ. При этом механизмы противовирусной защиты нейтрофильных гранулоцитов (НГ) и в частности особенности экспрессии NF-kB в доступной нам литературе не освещены. Цель исследования: изучить особенности экспрессии ядерного фактора NF-kB, мембранных рецепторов к IFN и IFN на НГ у пациентов, страдающих атипичными хроническими активными герпесвирусными инфекциями (АХА-ГВИ), с последующей оценкой в эксперименте in vitro эффектов влияния на них синтетического аналога активного центра гормона тимопоэтина аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин (гексапептид (ГП), Иммунофан, Россия). Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 25 пациентов обоих полов в возрасте от 23 до 64 лет, страдающих АХА-ГВИ, манифестирующими синдромом хронической усталости и различными когнитивными расстройствами. Дизайн исследования: этап 1 включал комплекс традиционных методов (сбор анамнеза, методы физикального обследования, ОАК и пр.), дополнительно для детекции герпес- вирусных инфекций использовались методы серодиагностики (определение IgM VCA EBV, IgG VCA EBV, IgM CMV, IgG CMV IgM HSV1/2, IgG HSV1/2 методом ИФА). Для обнаружения генома вирусов в биоматериалах (кровь, слюна, моча, соскоб с миндалин и задней стенки глотки) был использован метод ПЦР-РВ. Этап 2 эксперимент in vitro: изучено 32 образца крови от 8 условно здоровых человек и 375 образцов крови от 25 пациентов с АХА-ГВИ: определен процент НГ, экспрессирующих NF-kB, IFN/R, IFNR и уровни их MFI с помощью проточной цитофлюориметрии до и после инкубации с ГП (гексапептидом). Результаты. В результате проведенного исследования у пациентов, страдающих АХА-ГВИ, был выявлен низкий уровень экспрессии (MFI) NF-kB у 100[%] НГ, который сочетался со сниженным процентом НГ, экспрессирующих IFN/R и IFNR, и низким уровнем сывороточных IFN и IFN по сравнению со здоровыми людьми. В эксперименте in vitro ГП оказывает неоднозначные вариативные эффекты влияния на экспрессию ядерного фактора NF-kB и мембранных рецепторов IFN/ и IFN НГ пациентов, страдающих АХА-ГВИ. Было показано, что 100[%] НГ экспрессировали NF-kB после воздействия ГП. Но только 48[%] пациентов (ГИ2) восстановили уровень экспрессии NF-kB (MFI) до нормального значения, а в 52[%] случаев (ГИ1) динамики не выявлено. В то же время ГП увеличил процент НГ, экспрессирующих IFN/R в ГИ2 и увеличил процент НГ, экспрессирующих IFN в ГИ 1. Заключение. Было показано, что ГП в эксперименте in vitro оказывает неоднозначное влияние на экспрессию NF-kB, процент НГ, экспрессирующих IFN/ и IFNR у пациентов с АХА-ГВИ. Мы предполагаем, что различный ответ на влияние ГП связан с врожденным или вторичным дефицитом NF-kB.
<p><em>Background.</em> Strategies used by herpes viruses with human cells are complex and multifaceted. On one hand, inborn defects in antiviral immune defense have been unveiled, which also affect interferon (IFN) system underlying development of chronic recalcitrant relapsing viral infections such as remittent respiratory viral infections, herpesvirus infections, and papillomavirus infections. On the other hand, numerous viruses are able to damage both immune system and IFN network. During inborn and acquired defects in IFN network, inborn or induced mutation in gene products involved in signaling cascades aimed at upregulating gene expression responsible for IFN production are observed. One of the strategies used by diverse viruses is altering some signaling pathways resulting in activated transcription factors including nuclear factor NF-kB. However, antiviral mechanisms executed by neutrophilic granulocytes (NGs), particularly affecting NF-kB expression have not been elucidated. Aim of the study: to study <em>in vitro</em> features of NF-kB expression and number of neutrophilic granulocytes (NG) expressing membrane IFN/R and IFNR in patients with atypical chronic active herpes virus infections (AChA-HVI), followed by assessing an effect of arginyl-alpha-aspartyl-lysyl-valyl-tyrosyl-arginine hexapeptide (HP), a synthetic analogue of the active center of the thymopoietin (active substance of drug Imunofan, Russia), on the expression of NG NF-kB and IFN/R and IFNR. <em>Materials and methods.</em> We observed 25 patients of both sexes aged 23 to 64 years with AChA-HVI, manifested by chronic fatigue syndrome and cognitive disorders. Study design: stage 1 clinical, ELISA, PCR methods, FC was used. Stage 2 the <em>in vitro</em> experiment: 32 blood samples from 8 healthy adults and 375 blood samples from 25 patients with AChA-HVI were analyzed: [%] NG expressing NF-kB, IFN/R, IFNR and the relevant MFI levels by using FC before and after incubation with HP. <em>Results.</em> Our study demonstrated low level (MFI) of NF-kB expression in 100[%] NG associated with decreased [%] of NG expressing IFN/R and IFNR in all patients with AChA-HVI and low serum level for IFN and IFN in comparison with healthy individuals. In the <em>in vitro</em> experiment there was shown that 100[%] of NG expressed NF-kB after exposure to HP. However, only 48[%] patients (SG 2) restored NF-kB expression level (MFI) to normal range and 52[%] of cases (SG 1) had no response. HP increased [%] of NG expressing IFN/R in SG 2 and increased [%] of NG expressing IFNR in SG 1. <em>Conclusions.</em> It was shown, that influence of HP <em>in vitro</em> has ambiguous effects on the expression of NF-kB, [%] of NG expressing IFN/R and IFNR in patients with AChA-HVI. We assume that different NF-kB response to HP is associated with inborn or secondary NF-kB deficiency.</p> Нестерова И.В. «Российский университет дружбы народов» (Медицинский институт); The Peoples» Friendship University of Russia; Кубанский государственный медицинский университет
Халтурина Е.О. Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Нелюбин В.Н. «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова»
Хайдуков С.В. ФНЦ ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинников
Чудилова Г.А. Кубанский государственный медицинский университет
«Российский университет дружбы народов» (Медицинский институт)
The Peoples» Friendship University of Russia
Кубанский государственный медицинский университет
Kuban State medical university
Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)
«Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова»
Moscow State University of Medicine and Dentistry
ФНЦ ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинников
Shemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry
Nesterova I.V. Kuban State medical university
Khalturina E.O. I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University)
Nelubin V.N. Moscow State University of Medicine and Dentistry
Khaidukov S.V. Shemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry
Chudilova G.A. Kuban State medical university
Evaluation of the effects in the in vitro system of synthetic thymic hexapeptide on the expression levels of NF-κB, IFNα/βR and CD119 neutrophilic granulocytes in patients with chronic herpes viral co-infections eng
Оценка влияния синтетического тимического гексапептида в системе in vitro на уровни экспрессии NF-κb, IFNα/βR и CD119 нейтрофильных гранулоцитов у пациентов с хроническими герпесвирусными коинфекциями
Текст визуальный электронный
Инфекция и иммунитет
SPb RAACI
Т. 12, № 5 С. 850-858
2022
герпесвирусные инфекции
herpesvirus infections
система интерферона
interferon system
ядерный фактор NF-kB
nuclear factor NF-kB
нейтрофильные гранулоциты
neutrophilic granulocytes
факторы транскрипции
transcription factors
гексапептид
hexapeptide
Статья
Стратегии взаимодействие герпесвирусов с клетками организма человека весьма сложны и многогранны. С одной стороны, существуют врожденные дефекты противовирусной иммунной защиты, в том числе и системы интерферонов, на фоне которых развиваются хронические упорно рецидивирующие вирусные инфекции, такие как повторные респираторные вирусные, герпесвирусные, папилломавирусные инфекции. С другой стороны, многие вирусы сами способны повреждать как иммунную систему, так и систему интерферонов. При врожденных и приобретенные дефектах системы интерферонов наблюдается врожденная или индуцированная мутация генов молекул, участвующих в сигналлинге, направленном на повышение экспрессии генов, ответственных за синтез IFN. Одной из стратегий вирусов является нарушение ряда клеточных сигнальных путей факторов транскрипции, в том числе ядерного фактора NF-kB. В настоящее время описана противовирусная активность НГ. При этом механизмы противовирусной защиты нейтрофильных гранулоцитов (НГ) и в частности особенности экспрессии NF-kB в доступной нам литературе не освещены. Цель исследования: изучить особенности экспрессии ядерного фактора NF-kB, мембранных рецепторов к IFN и IFN на НГ у пациентов, страдающих атипичными хроническими активными герпесвирусными инфекциями (АХА-ГВИ), с последующей оценкой в эксперименте in vitro эффектов влияния на них синтетического аналога активного центра гормона тимопоэтина аргинил-альфа-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин (гексапептид (ГП), Иммунофан, Россия). Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 25 пациентов обоих полов в возрасте от 23 до 64 лет, страдающих АХА-ГВИ, манифестирующими синдромом хронической усталости и различными когнитивными расстройствами. Дизайн исследования: этап 1 включал комплекс традиционных методов (сбор анамнеза, методы физикального обследования, ОАК и пр.), дополнительно для детекции герпес- вирусных инфекций использовались методы серодиагностики (определение IgM VCA EBV, IgG VCA EBV, IgM CMV, IgG CMV IgM HSV1/2, IgG HSV1/2 методом ИФА). Для обнаружения генома вирусов в биоматериалах (кровь, слюна, моча, соскоб с миндалин и задней стенки глотки) был использован метод ПЦР-РВ. Этап 2 эксперимент in vitro: изучено 32 образца крови от 8 условно здоровых человек и 375 образцов крови от 25 пациентов с АХА-ГВИ: определен процент НГ, экспрессирующих NF-kB, IFN/R, IFNR и уровни их MFI с помощью проточной цитофлюориметрии до и после инкубации с ГП (гексапептидом). Результаты. В результате проведенного исследования у пациентов, страдающих АХА-ГВИ, был выявлен низкий уровень экспрессии (MFI) NF-kB у 100[%] НГ, который сочетался со сниженным процентом НГ, экспрессирующих IFN/R и IFNR, и низким уровнем сывороточных IFN и IFN по сравнению со здоровыми людьми. В эксперименте in vitro ГП оказывает неоднозначные вариативные эффекты влияния на экспрессию ядерного фактора NF-kB и мембранных рецепторов IFN/ и IFN НГ пациентов, страдающих АХА-ГВИ. Было показано, что 100[%] НГ экспрессировали NF-kB после воздействия ГП. Но только 48[%] пациентов (ГИ2) восстановили уровень экспрессии NF-kB (MFI) до нормального значения, а в 52[%] случаев (ГИ1) динамики не выявлено. В то же время ГП увеличил процент НГ, экспрессирующих IFN/R в ГИ2 и увеличил процент НГ, экспрессирующих IFN в ГИ 1. Заключение. Было показано, что ГП в эксперименте in vitro оказывает неоднозначное влияние на экспрессию NF-kB, процент НГ, экспрессирующих IFN/ и IFNR у пациентов с АХА-ГВИ. Мы предполагаем, что различный ответ на влияние ГП связан с врожденным или вторичным дефицитом NF-kB.
<p><em>Background.</em> Strategies used by herpes viruses with human cells are complex and multifaceted. On one hand, inborn defects in antiviral immune defense have been unveiled, which also affect interferon (IFN) system underlying development of chronic recalcitrant relapsing viral infections such as remittent respiratory viral infections, herpesvirus infections, and papillomavirus infections. On the other hand, numerous viruses are able to damage both immune system and IFN network. During inborn and acquired defects in IFN network, inborn or induced mutation in gene products involved in signaling cascades aimed at upregulating gene expression responsible for IFN production are observed. One of the strategies used by diverse viruses is altering some signaling pathways resulting in activated transcription factors including nuclear factor NF-kB. However, antiviral mechanisms executed by neutrophilic granulocytes (NGs), particularly affecting NF-kB expression have not been elucidated. Aim of the study: to study <em>in vitro</em> features of NF-kB expression and number of neutrophilic granulocytes (NG) expressing membrane IFN/R and IFNR in patients with atypical chronic active herpes virus infections (AChA-HVI), followed by assessing an effect of arginyl-alpha-aspartyl-lysyl-valyl-tyrosyl-arginine hexapeptide (HP), a synthetic analogue of the active center of the thymopoietin (active substance of drug Imunofan, Russia), on the expression of NG NF-kB and IFN/R and IFNR. <em>Materials and methods.</em> We observed 25 patients of both sexes aged 23 to 64 years with AChA-HVI, manifested by chronic fatigue syndrome and cognitive disorders. Study design: stage 1 clinical, ELISA, PCR methods, FC was used. Stage 2 the <em>in vitro</em> experiment: 32 blood samples from 8 healthy adults and 375 blood samples from 25 patients with AChA-HVI were analyzed: [%] NG expressing NF-kB, IFN/R, IFNR and the relevant MFI levels by using FC before and after incubation with HP. <em>Results.</em> Our study demonstrated low level (MFI) of NF-kB expression in 100[%] NG associated with decreased [%] of NG expressing IFN/R and IFNR in all patients with AChA-HVI and low serum level for IFN and IFN in comparison with healthy individuals. In the <em>in vitro</em> experiment there was shown that 100[%] of NG expressed NF-kB after exposure to HP. However, only 48[%] patients (SG 2) restored NF-kB expression level (MFI) to normal range and 52[%] of cases (SG 1) had no response. HP increased [%] of NG expressing IFN/R in SG 2 and increased [%] of NG expressing IFNR in SG 1. <em>Conclusions.</em> It was shown, that influence of HP <em>in vitro</em> has ambiguous effects on the expression of NF-kB, [%] of NG expressing IFN/R and IFNR in patients with AChA-HVI. We assume that different NF-kB response to HP is associated with inborn or secondary NF-kB deficiency.</p>