Зырина А.Н. Анна Николаевна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Целых И.О. Ирина Олеговна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Богдан А.С. Анастасия Сергеевна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»; МИРЭА — Российский технологический университет
Ковпак А.А. Анастасия Александровна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова» РАН
Ивин Ю.Ю. Юрий Юрьевич «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Василенко В.Е. Владислав Евгеньевич «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Пиняева А.Н. Анастасия Николаевна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Шишова А.А. Анна Андреевна «Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»; Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова
«Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН»
Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
МИРЭА — Российский технологический университет
MIREA — Russian Technological University
«Федеральный НЦ исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова» РАН
Sechenov First Moscow State Medical Univesity
Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова
Moscow Medical Academy of I. M. Sechenov
Zyrina A.N. Anna N. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Tselykh I.O. Irina O. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Bogdan A.S. Anastasia S. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences; MIREA — Russian Technological University
Kovpak A. Anastasia Sechenov First Moscow State Medical Univesity
Ivin Y.Y. Yury Yu. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Vasilenko V.E. Vladislav E. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Piniaeva A.N. Anastasia N. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences
Shishova А.A. Аnna A. Chumakov Federal Scientific Center for Research and Development of Immune-and-Biological Products of Russian Academy of Sciences; Moscow Medical Academy of I. M. Sechenov
Method of obtaining purified SARS-CoV-2 antigen for structural and immunological studies in whole-virion vaccines against coronavirus infection eng
Методика получения очищенного антигена SARS-CoV-2 для структурных и иммунологических исследований цельновирионных вакцин против коронавирусной инфекции
Текст визуальный электронный
Медицинский академический журнал
Eco-Vector
Т. 22, № 2 С. 183-189
2022
цельновирионные вакцины
whole-virion vaccines
коронавирусная инфекция
coronavirus infection
SARS-CoV-2
SARS-CoV-2
очищенный вирус
purified virus
сахарозный градиент
sucrose gradient
Статья
<strong><em>Обоснование.</em></strong> Несмотря на масштабные разработки вакцин против коронавирусной инфекции, до сих пор нет полной информации об антигенной структуре вирусной частицы SARS-CoV-2. В этой статье предлагается авторский метод получения чистого концентрированного цельновирионного препарата, который может быть использован в различных исследованиях.
<strong><em>Цель статьи</em></strong> разработать оптимальную методику очистки инактивированного вируса SARS-CoV-2 для получения препарата, по чистоте и содержанию антигена достаточного для проведения структурных и иммунологических исследований.
<strong><em>Материалы и методы.</em></strong> Для получения чистого концентрированного вируса SARS-CoV-2 использовали метод ультрацентрифугирования в плотности сахарозного градиента. Фракции с наибольшим содержанием вирусных частиц оценивали по концентрации нуклеокапсида N и гликопротеина S. Чистоту объединенных фракций (очищенного образца) оценивали по наличию примесных белков, токсинов и бычьего сывороточного альбумина.
<strong><em>Результаты.</em></strong> Определены оптимальные условия получения инактивированного очищенного цельного вируса SARS-CoV-2, выделен и охарактеризован его стандартный образец.
<strong><em>Заключение.</em></strong> Полученный стандартный образец вируса SARS-CoV-2 можно использовать в иммуноферментном анализе для измерения количества антигена в цельновирионных вакцинах против коронавирусной инфекции, а также в различных исследованиях структуры вирусной частицы SARS-CoV-2.
<p><strong><em>BACKGROUND:</em></strong> Despite the large-scale development of vaccines against coronavirus infection, there is still no complete information about the antigenic structure of the SARS-CoV-2 virus particles. This article describes a method of obtaining a pure concentrated whole-virion sample that can be used in various studies.</p>
<p><strong><em>AIM:</em></strong> The goal is to develop an optimal method of purification of the inactivated SARS-CoV-2 virus in order to obtain a standard with parameters of purity and antigen content sufficient for structural and immunological studies.</p>
<p><strong><em>MATERIALS AND METHODS:</em></strong> To obtain a pure concentrated virus SARS-CoV-2 we used the sucrose density gradient ultracentrifugation. Fractions with the highest content of viral particles were evaluated based on the concentration of nucleocapsid N and glycoprotein S. The purity of the pooled fractions (the purified sample) was evaluated by the presence of impurity proteins, toxins and bovine serum albumin.</p>
<p><strong><em>RESULTS:</em></strong> The optimal conditions for obtaining the inactivated purified SARS-CoV-2 whole virus were determined. A standard sample of the inactivated SARS-CoV-2 virus was isolated and characterized.</p>
<p><strong><em>CONCLUSIONS:</em></strong> The obtained standard sample can be used in enzyme immunoassay to measure the amount of antigen in whole-virion vaccines against coronavirus infection, as well as in various structural studies of SARS-CoV-2 virus particle.</p>