Аннотация:
Цель настоящего исследования состояла в разработке метода одновременной иммуногистохимической детекции нейронов и астроцитов с использованием пероксидазной метки с последующим анализом при помощи микроскопии в проходящем свете. Для этого была выбрана пара антигенов, каждый из которых специфически выявляет либо только нейроны, либо астроциты (в качестве маркеров были использованы ядерный белок нервных клеток (NeuN) и глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) соответственно). Данная методика дает возможность не только идентифицировать исследуемые клетки, но и оценивать их функциональное состояние как в норме, так и при патологических воздействиях. Предложенный протокол окраски позволяет значительно упростить и оптимизировать процесс обнаружения одновременно двух антигенов на препарате и способствует повышению качества получаемых препаратов.
This study aimed to develop a method of simultaneous immunohistochemical detection of neurons and astrocytes using peroxidase labeling with subsequent analysis by light microscopy. A pair of antigens, each of which specifically identifies either neurons or astrocytes, was chosen (as markers neuronal nuclear antigen and glial fibrillary acidic protein were used, respectively). This method not only identifies the studied cells, but it also assesses their functional state under normal and pathological conditions. The proposed staining protocol allows significant simplification and optimization to simultaneously detect two antigens and to improve the quality of the slices obtained. Калинина Ю.А. «Институт экспериментальной медицины»; «Транс-Технологии»
Суфиева Д.А. «Институт экспериментальной медицины»; «Институт эволюционной физиологии и биохимии имени И. М. Сеченова» Российской академии наук
«Институт экспериментальной медицины»
Institute of Experimental Medicine
«Транс-Технологии»
Trans-Technologies, Ltd
«Институт эволюционной физиологии и биохимии имени И. М. Сеченова» Российской академии наук
Sechenov institute of evolutionary physiology and biochemistry Russian academy of sciences
Kalinina Y.A. Yu A Institute of Experimental Medicine; Trans-Technologies, Ltd
Sufieva D.A. Institute of Experimental Medicine; Sechenov institute of evolutionary physiology and biochemistry Russian academy of sciences
Immunohistochemical method of simultaneous detection of neurons and astrocytes in the rat brain eng
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ МЕТОД ОДНОВРЕМЕННОГО ВЫЯВЛЕНИЯ НЕЙРОНОВ И АСТРОЦИТОВ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ КРЫСЫ
Текст визуальный электронный
Медицинский академический журнал
Eco-Vector
Т. 18, № 3 С. 46-51
2018
ядерный белок нервных клеток (NeuN)
neuronal nuclear antigen (NeuN)
глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP)
glial fibrillary acidic protein (GFAP)
иммуногистохимия
immunohistochemistry
световая микроскопия
light microscopy
Статья
Цель настоящего исследования состояла в разработке метода одновременной иммуногистохимической детекции нейронов и астроцитов с использованием пероксидазной метки с последующим анализом при помощи микроскопии в проходящем свете. Для этого была выбрана пара антигенов, каждый из которых специфически выявляет либо только нейроны, либо астроциты (в качестве маркеров были использованы ядерный белок нервных клеток (NeuN) и глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) соответственно). Данная методика дает возможность не только идентифицировать исследуемые клетки, но и оценивать их функциональное состояние как в норме, так и при патологических воздействиях. Предложенный протокол окраски позволяет значительно упростить и оптимизировать процесс обнаружения одновременно двух антигенов на препарате и способствует повышению качества получаемых препаратов.
This study aimed to develop a method of simultaneous immunohistochemical detection of neurons and astrocytes using peroxidase labeling with subsequent analysis by light microscopy. A pair of antigens, each of which specifically identifies either neurons or astrocytes, was chosen (as markers neuronal nuclear antigen and glial fibrillary acidic protein were used, respectively). This method not only identifies the studied cells, but it also assesses their functional state under normal and pathological conditions. The proposed staining protocol allows significant simplification and optimization to simultaneously detect two antigens and to improve the quality of the slices obtained.