Маркеры опухолевого микроокружения при инкубации биоптатов рака молочной железы

Цель. Изучить спонтанную и стимулированную продукцию цитокинов в биоптатах рака молочной железы (РМЖ) в зависимости от степени распространенности опухолевого роста.Материалы и методы. Проведено экспериментальное исследование с клеточными культурами биоптатов РМЖ I–II стадии (группа 1, n = 15) и III–IV стадии (группа 2, n = 15). Контроль составили 6 здоровых женщин, которым выполнена мастопексия. Методом иммуноферментного анализа определяли спонтанную и индуцированную ком-плексом поликлональных активаторов (ПА: фитогемагглютинин 4 мкг/мл, конканавалин А 4 мкг/мл, липополисахарид 2 мкг/мл) концентрацию TNF-α, IFN-γ, G-CSF, GM-CSF, VEGF, MCP-1, TGF-β1. Вычисляли индекс влияния поликло-нальных активаторов (ИВПА) на продукцию цитокинов (индуцированная продукция / спонтанная продукция). Для сравнения групп применяли критерий Манна – Уитни и медианный критерий, критерий хи-квадрат и точный критерий Фишера.Результаты. Группы 1 и 2 не различались по возрасту, гистологическому варианту и иммуногистохимическому типу опухоли, преобладал преимущественно инвазивный рак без признаков специфичности. В группе 2 чаще отмеча-лась выраженная степень васкуляризации: у 6 (40[%]) пациенток против 1 (7[%]) в группе 1 (р < 0,05). В обеих группах по сравнению с контролем отмечено статистически значимое (р < 0,05) повышение спонтанной продукции: TNF-α – в 4,2 и 4,8 раза, MCP-1 – в 6,7 и 6,3 раза, TGF-β1 – в 2,2 и 2,5 раза, VEGF – в 11,9 и 14,6 раза, GМ-CSF – в 15,6 и 13,4 раза, G-CSF – в 96,8 и 79,5 раза соответственно. Концентрация МСР-1 и IFN-γ была выше в группе 1 (р < 0,05), VEGF и TGF-β1 – в группе 2 (р < 0,05). ИВПА в группе 2 превышал аналогичные значения в группе 1 для G-CSF, VEGF, TGF-β1 (р < 0,05).Заключение. Продукция цитокинов (TNF-α, MCP-1, GМ-CSF, G-CSF, VEGF, TGF-β1) в биоптатах РМЖ значительно выше, чем в биоптатах неизмененной молочной железы, и зависит от стадии опухолевого процесса.

Aim. To study the spontaneous and stimulated production of cytokines in biopsies of breast cancer (BC) depending on the cancer stage.Materials and methods. An experimental study was carried out with cell cultures of breast cancer biopsies of stages I–II (group 1, n = 15) and III–IV stages (group 2, n = 15). The control consisted of 6 healthy women who underwent mastopexy. We used enzyme immunoassay method to access spontaneous and induced by a complex of polyclonal activators (PA: phytohemagglutinin 4 μg / ml, concanavalin A 4 μg / ml, lipopolysaccharide 2 μg / ml) concentration of TNF-α, IFN-γ, G-CSF, GM-CSF, VEGF, MCP-1, TGF-β1. The index of the effect of polyclonal activators (IVPA) on cytokine production (induced production / spontaneous production) was calculated. To compare groups, the Mann-Whitney test and the median test, the chi-square test and the Fisher’s exact test were used.Results. Groups 1 and 2 did not differ in age, histological variant and immunohistochemical type of tumour, predominantly invasive cancer without signs of specificity prevailed. In group 2, a pronounced vascularization was more often observed: in 6 (40[%]) patients versus 1 (7[%]) in group 1 (p < 0.05). In both groups, compared with the control, there was a statistically sig-nificant (p < 0.05) increase in spontaneous production of TNF-α by 4.2 and 4.8 times, MCP-1 by 6.7 and 6.3 times, TGF-β1 – 2.2 and 2.5 times, VEGF 11.9 and 14.6 times; GM-CSF 15.6 and 13.4 times, G-CSF 96.8 and 79.5 times, respectively. The concentration of MCP-1 and IFN-γ was higher in group 1 (p < 0.05), VEGF and TGF-β1 – in group 2 (p < 0.05). IVPA in group 2 exceeded similar values   in group 1 for G-CSF, VEGF, TGF-β1 (p < 0.05).Conclusion. The production of cytokines (TNF-α, MCP-1, GM-CSF, G-CSF, VEGF, TGF-β1) in breast cancer biopsies is significantly higher than in biopsies of the unchanged mammary gland and depends on the stage of the tumour process.